2x SYBR Green qPCR Master Mix
2x SYBR Green qPCR Master Mix(Low ROX)
2x SYBR Green qPCR Master Mix(High ROX)
Protein A/G免疫沉淀磁珠
Anti-Flag免疫磁珠
Anti-Flag亲和凝胶
Anti-Myc免疫磁珠
Anti-HA免疫磁珠
Poly FlAG多肽
蛋白酶抑制剂Cocktail(DMSO储液)
磷酸酶抑制剂Cocktail
Cell Counting Kit-8 (CCK-8)
鼠尾直接PCR试剂盒(快速基因型鉴定)
小鼠CD3
+
T细胞分选试剂盒
小鼠CD4
+
T细胞分选试剂盒
小鼠CD8
+
T细胞分选试剂盒
体外研究活性
Mycophenolate mofetil是一种活性免疫抑制剂霉酚酸(MPA)的酯类前药。后者对I/II型次黄甘酸脱氢酶表现出非竞争性,选择性和可逆的抑制活性,IC50分别为39 nM和27 nM。此外,MPA也会对ConA刺激的T细胞增殖产生浓度依赖性抑制,LPS刺激的B细胞增殖和同种抗原特异性T细胞的增殖,IC50分别为100 nM,120 nM,和51 nM。
[1]
Mycophenolate mofetil在10 μg/mL的高浓度下诱导强烈的小胶质细胞培养物凋亡,并增加活化的caspase-3免疫反应性凋亡细胞的数量。此外,Mycophenolate mofetil (1 μg/mL)强烈抑制小胶质细胞和星形胶质细胞的增殖。
[2]
最近的一项研究表明,神经元损伤后,Mycophenolate mofetil时间依赖性显著减弱器官型海马切片培养物中神经元细胞死亡的程度。
[4]
将8周大雄性Lewis大鼠的脾脏无菌移除,制备成单细胞悬浮液,得到的脾细胞悬浮在包含10% 胎牛血清,100 U/mL青霉素,和100 μg/mL链霉素的RPMI1640培养基中。试验在平底微量滴定板中进行,每个孔包含150000脾细胞,总体积为100 μL。脾细胞在包含1 μg/mL 伴刀豆球蛋白A (ConA) 或脂多糖(LPS)( 分别作为T或B细胞分裂素)的培养基中,与不同浓度的MPA在37 °C,潮湿的5% CO
2
-95%空气环境中培养48小时。在培养的最后6小时,细胞用1 μCi
3
H-胸苷/孔脉冲处理,并采集到细胞采集器加压的玻璃纤维上。增殖细胞对
3
H-胸苷的摄取使用液体闪烁计数器测定。同种抗原-特异性T细胞的体外免疫反应使用一种混合淋巴细胞反应试验以增殖响应评估。来自8周大雄性Lewis大鼠的肠系膜淋巴结细胞和来自8周大雄性ACI大鼠的脾细胞分别用作响应器和刺激细胞。制备单细胞悬浮液,响应细胞与辐射(20 Gy)刺激细胞在RPMI1640中,用10%胎牛血清,100 U/mL青霉素和100 μg/mL链霉素增补,在96孔板(U-底部),且不同浓度MPA (总体积:200 μL,37 °C,5% CO
2
湿润的大气,72 小时)存在下进行培养。作为阴性对照,应答细胞与辐射的Lewis大鼠脾细胞进行培养。细胞增殖通过
3
H-胸苷的摄取定量。
Not yet recruiting
Hyperglycemia|Renal Transplant Complication Primary Non-Function|Diabetes
Rigshospitalet Denmark|Aarhus University Hospital|Odense University Hospital
April 1 2024
Phase 4
NCT05859191
Recruiting
Systemic Lupus Erythematosus|Physiopathology
University Hospital Tours|Research Center for Respiratory Diseases Inserm U1100
July 21 2023
NCT05120570
Recruiting
Acute Leukemia|Myelodysplastic Syndromes|Myeloproliferative Neoplasm|Lymphoma
Masonic Cancer Center University of Minnesota
March 17 2022
Phase 1|Phase 2
[1] Nakanishi T, et al. Int Immunopharmacol. 2010, 10(1), 91-97.
[2] Dehghani F, et al. Neuropathol Appl Neurobiol. 2010, 36(7), 598-611.
[3] Ozgen M, et al. Clin Exp Dermatol. 2012, 37(1), 48-54.
[4] Ebrahimi F, et al. J Neuroinflammation. 2012, 9(1), 89.
工作液浓度:
mg/ml;
DMSO母液配制方法:
mg
药物溶于
μL DMSO溶液(母液浓度
mg/mL,
注
:如该浓度超过该批次药物DMSO溶解度,请先联系Selleck);
体内配方配制方法:
取
μL
DMSO母液,加入
μL PEG300,混匀澄清后加入
μL
Tween 80,混匀澄清后加入
μL ddH
2
O,混匀澄清。
体内配方配制方法:
取
μL
DMSO母液,加入
μL Corn oil,混匀澄清。
注意:
1. 首先保证母液是澄清的;
2.一定要按照顺序依次将溶剂加入,进行下一步操作之前必须保证上一步操作得到的是澄清的溶液,可采用涡旋、超声或水浴加热等物理方法助溶。
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